近年來，細胞增殖一直是生物醫(yī)學領(lǐng)域的研究熱點。細胞增殖是指細胞在周期調(diào)控因子的作用下，通過 DNA復制、RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成等復雜反應而進行的分裂系列過程，其中核DNA的復制倍增是整個過程的重要特征。細胞增殖檢測技術(shù)廣泛應用于分子生物學、腫瘤生物學、藥理和藥代動力學等研究領(lǐng)域，不僅在研究細胞的基本生物學特征中非常重要，而且是分析細胞狀態(tài)、研究遺傳性狀的一種基本方法，可為探討疾病的發(fā)病機制、診斷疾病及治療疾病提供有價值的資料。檢測細胞增殖的方法目前主要分為代謝活性檢測、DNA合成檢測、細胞增殖相關(guān)抗原檢測等。此外，還可以檢測ATP等酶活性、鈣離子內(nèi)流、細胞膜完整性等，每種檢測方法都存在各自的優(yōu)缺點，應根據(jù)不同的實驗目的，盡量選擇準確性高、重復性好的檢測方法或?qū)⒍喾N檢測方法結(jié)合，從而客觀、全面地反映實驗結(jié)果。小愛主要介紹代謝活性檢測和DNA合成檢測兩種常用的細胞增殖檢測方法。
一、代謝活性檢測
CCK-8試劑盒
產(chǎn)品簡介：Cell Counting Kit 8簡稱CCK-8試劑盒，是用于測定細胞增殖或毒性實驗中活細胞數(shù)目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。
檢測原理：CCK-8基于水溶性四唑鹽WST-8。WST-8在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜(Formazan)染料。甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，與活細胞數(shù)量成正比。通過比色，可以動態(tài)地量化活細胞的數(shù)量，從而對細胞增殖或藥物毒性進行檢測本試劑盒通常用于貼壁或懸浮細胞的周期與凋亡檢測。如果用于組織，則需要把組織消化成單細胞狀態(tài)，再進行檢測。
產(chǎn)品優(yōu)勢：CCK-8溶液可以直接加入到細胞樣品中，不需要預配各種成分，檢測快速，毒性非常低，經(jīng)濟實惠。應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。
CFSE {5(6)-羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯
產(chǎn)品簡介：CFSE是一種可穿透細胞膜的熒光染料，具有與細胞特異性結(jié)合的琥珀酰亞胺脂基團和具有非酶促水解作用的羥基熒光素二醋酸鹽基團，使其成為一種良好的細胞標記物。
檢測原理：CFSE本身沒有顏色和熒光，直至細胞內(nèi)的酯酶去除其醋酸鹽基團，產(chǎn)生能發(fā)出明亮熒光的羧基熒光素琥珀酰亞胺酯。琥珀酰亞胺酯與細胞內(nèi)氨基反應，形成穩(wěn)定且能用醛固定劑固定的熒光偶聯(lián)物，被CFSE 標記的細胞呈綠色熒光。
產(chǎn)品優(yōu)勢：應用廣泛，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介：MTT 法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。
檢測原理：活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臜并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比，吸光度越大，表示細胞活性越強，說明藥物毒性越小。
產(chǎn)品優(yōu)勢： 靈敏度高、經(jīng)濟實惠。已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。
Alamar Blue 阿爾瑪藍細胞增殖及毒性檢測試劑 abs47047610
產(chǎn)品簡介： 阿爾瑪藍（Alamar Blue）是一種細胞活力檢測試劑，包含一種具細胞膜滲透性、無毒性且弱藍色熒光的指示劑刃天青（resazurin）。
檢測原理：刃天青是一種氧化還原指示劑，根據(jù)細胞代謝還原情況發(fā)生顏色變化。氧化態(tài)的刃天青呈紫藍色且基本無熒光，其還原態(tài)產(chǎn)物試鹵靈（resorufin）轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t色且高度熒光，產(chǎn)生的熒光強度與呼吸活細胞數(shù)量呈正比。阿爾瑪藍的顏色變化可通過普通分光光度計檢測吸光度變化，檢測波長為570nm，參考波長為600nm；阿爾瑪藍的熒光變化可通過熒光光度計檢測，激發(fā)波長在530~560nm之間，發(fā)射波長為590nm。
產(chǎn)品優(yōu)勢： 阿爾瑪藍為單一試劑，可連續(xù)快速的檢測細胞的增殖情況。阿爾瑪藍對細胞無毒無害，不會干擾電子傳遞鏈，不會干擾細胞呼吸或功能，也不會影響細胞的抗體合成與分泌等活性。適用于對同一批細胞的增殖情況進行連續(xù)觀察和更進一步的觀察，操作簡便且?guī)缀醪桓蓴_細胞正常代謝。
二、DNA 合成檢測
Brdu（5-溴脫氧尿嘧啶核苷）
產(chǎn)品簡介：BrdU( bromodeoxy uridine) 是一種胸腺嘧啶核苷類似物，其胸腺嘧啶環(huán)與5位C連接的甲基被溴取代。
檢測原理：BrdU 可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活體注射或細胞培養(yǎng)加入，而后利用抗Brdu單克隆抗體，ICC染色，顯示增殖細胞。
產(chǎn)品優(yōu)勢：目前常用的細胞增殖標記物有4種，Brdu、DNA polymerase α、PCNA 、Ki-67等。因組織細胞內(nèi)無內(nèi)源性Brdu存在，特異性強，所以Brdu應用較廣。
